摘要:
目的探讨结核菌素纯蛋白衍生物（pure protein derivative,PPD）对人外周血γδT细胞的刺激效应。方法采用Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）后,经尼龙毛柱法分离得T细胞。分别以卡介苗和PPD刺激γδT细胞,流式细胞仪分选纯化γδT细胞,并检测其抗原提呈细胞表型。按照T细胞培养基成分将实验分为4组（n=20）：①空白组：结核分枝杆菌分泌性抗原（Mtb-Sag）25μg/ml＋CFSE标记的T淋巴细胞;②卡介苗（BCG）组：BCG刺激γδT细胞＋Mtb-Sag 25μg/ml＋CFSE标记T淋巴细胞;③PPD组：PPD刺激γδT细胞＋Mtb-Sag 25μg/ml＋CFSE标记T淋巴细胞;④树突状细胞（dendritic cell,DC）组：成熟DC＋Mtb-Sag 25μg/ml＋CFSE标记T淋巴细胞。9 d后检测T细胞及CD4＋T细胞的增殖情况。结果与静止期相比,PPD可刺激γδT细胞CD80、CD86和HLA-DR表达水平升高至（39.07±1.26）%、（51.93±1.85）%和（45.74±1.58）%（P〈0.05）,与BCG刺激效应相似[（42.12±1.72）%,（54.67±2.01）%,（49.79±1.61）%,P〉0.05]。PPD组T细胞总数（5.14±0.68）×106和CD4＋T细胞所占比例（35.01%）较空白组显著升高（P〈0.05）,与BCG组[（4.6±0.77）×106,32.00%）]相似,显著低于成熟DC细胞组[（7.50±0.35）×106,58.94%]（P〈0.05）。结论 PPD可激活γδT细胞CD80、CD86和HLA-DR表达,提示PPD可能具有激活人外周γδT细胞功能。
