高效液相色谱法检测聚乙二醇化重组人干扰素α2b注射液中N-羟基琥珀酰亚胺含量

目的建立检测聚乙二醇化重组人干扰素α2b（PEGylated recombinant human interferonα2b,PEG-IFNα2b）注射液中N-羟基琥珀酰亚胺（N-hydroxy succinimide,NHS）含量的高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）法。方法以TSK G3000SW（7.8 mm×300 mm,10μm,TOSOH）为色谱柱,用20 mmol/L PB（p H 7.0）-145 mmol/L Na Cl-5%异丙醇为流动相,流速为0.6 ml/min,检测波长为260 nm,建立检测PEG-IFNα2b注射液中NHS含量的HPLC方法,进行专属性、系统适应性、准确性验证,并确定该方法的线性范围、定量限和最低检测限。用建立的方法检测3批PEG-IFNα2b注射液中NHS的含量。结果该方法专属性、系统适应性及准确性良好;线性范围为0.00 977~2.50μg/ml（R^2=0.999 985）;最低定量限为0.002 4μg/ml（0.002%）,最低检测限为0.001 2μg/ml（0.001%）。3批PEG-IFNα2b注射液样品中均未检出NHS,表明样品中NHS小于0.001%。结论建立的HPLC法准确、可靠,可用于PEG-IFNα2b注射液中NHS含量的测定。