二氮嗪对新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞损伤时线粒体凋亡途径的影响

目的研究二氮嗪对新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞（HK-2）损伤时线粒体凋亡途径的影响。方法取培养好的HK-2细胞，接种于6孔板中，分为对照组、窒息组、二氮嗪组。以体积分数为20％的新生儿窒息后24h血清作为攻击血清；以终浓度100mol／L的二氮嗪进行干预。采用免疫组化法检测细胞内天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）的表达；激光共聚焦显微镜下观察间接免疫荧光双染色Omi／HtrA2在细胞内的转位和线粒体膜电位的变化。结果与对照组相比，窒息组HK-2细胞内caspase-3表达的吸光度（A）值明显增加（25．19±3．33比13．63±1．89，P〈0．01），Omi／HtrA2转位率明显升高[（56．01±5．30）％比（37．59±5．60）％，P〈o．01]，线粒体膜红／绿荧光强度比值明显降低（o．79士1．42比1．82±0．23，P〈0．01）；与窒息组相比，二氮嗪组HK-2细胞caspase-3表达的4值（20．17±2．19）明显降低，Omi／HtrA2转位率（（46．91±2．70）％]明显降低，线粒体膜红／绿荧光强度比值（1．47±0．14）明显增加，但均未恢复至对照组水平（均P〈0．01）。结论二氮嗪通过减少Omi／HtrA2在胞内转位、减少caspase-3表达、稳定线粒体膜电位，从而明显减轻新生儿窒息后血清诱导的HK-2细胞损伤。