摘要:
目的：建立松叶中槲皮素、山柰酚的HPLC含量测定方法,为松叶药材质量标准的建立提供参考。同时对不同产地、不同种属松叶进行比较研究。方法：采用高效液相色谱法,使用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以0.5%磷酸（A）-乙腈（B）为流动相,梯度洗脱（0～9 min,25%B→30%B;9～19 min,30%B;19～20 min,30%B→25%B;20～40 min,25%B）,流速0.8 mL·min^-1,检测波长380 nm,柱温30℃。通过优化参数（脱色、脱色溶剂、甲醇预提、盐酸水溶液浓度、溶剂用量、提取时间）确定槲皮素、山柰酚含量测定预处理的最佳条件,并测定不同产地马尾松及同一产地不同种属松叶中槲皮素、山柰酚的含量。结果：槲皮素、山柰酚的含量测定预处理方法为：石油醚（30～60℃）脱色,甲醇-盐酸水溶液（5.0→10）（4∶1）50 mL,回流提取110 min;松叶中槲皮素进样量在0.13～2.24μg范围内线性关系良好（r=0.9997）,平均回收率为98.6%（RSD=1.6%）;山柰酚进样量在0.20～1.04μg范围内线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为100.5%（RSD=2.4%）;两者方法精密度及重复性均良好。在所测的不同产地马尾松中槲皮素、山柰酚总含量为0.715%～0.371%,其中广西产马尾松最高,江苏产马尾松含量最低;在吉林产不同种属松叶中槲皮素、山柰酚的含量为0.846%～0.515%,以红松最高,樟子松最低。结论：本方法经过方法学考察证明可用于松叶药材中槲皮素、山柰酚的含量测定;不同产地马尾松和不同种属松叶中槲皮素、山柰酚含量有一定差异。
