摘要:
海桑(Sonneratia caseolaris(L.)Engler)是海桑科一种重要的红树植物.为利用ISSR分子标记研究海桑的遗传多样性,对影响ISSR-PCR的多个因素,包括Taq酶的用量、Mg2+浓度和dNTP浓度、引物浓度及其退火温度、模板DNA浓度等进行研究,确定了海桑ISSR-PCR分析的最适条件:10μL PCR反应体积中,10×buffer(100mmol·L-1KCl,80 mmol·L-1(NH4)2SO4,100 mmol·L-1 Tris-HCl,pH 9.0,0.5%NP-40)1μL,0.35 U Taq酶,2~3.75 mmol·L-1Mg2+,300μmol·L1dNTP,0.3μmol·L-1引物,10 ng模板DNA.