摘要:
目的通过不同浓度的叔丁基过氧化氢（Tert-Butyl bydroperoxide，TBHP）作用于培养的小鼠胚肺成纤维细胞系L929细胞，观察低浓度的TBHP对细胞生长、增殖的影响。方法按TBHP的终浓度从低到高分别为：空白组（0μmol／L）、低浓度组（1μmol／L）、中浓度组（10μmol／L）和高浓度组（40μmol／L）分成四组。通过破壁灵芝孢子粉水提液（2．0s／L）作用L929细胞系24h，使细胞同步化，分别加入相应浓度的TBHP溶液。用MTT比色法检测细胞活力，并以溴脱氧尿嘧啶核苷（bromode-oxyuridine，BrdU）的免疫荧光染色法观察各组细胞的增殖变化，同时在相差显微镜下观察细胞的形态学变化。结果镜下观察发现，TBHP1μmol／L组细胞密度高于空白组和中、高浓度组，且BrdU阳性细胞数目最多，细胞生长旺盛；MTT结果显示TBHP1μmol／L组OD值最高，其次为空白组和中浓度组，高浓度组最低（P〈0．01），BrdU阳性荧光显色主要在刚刚分裂完成的细胞，呈现“镜像性”改变。结论低浓度TBHP对体外培养L929细胞的增殖、生长具有一定促进作用，BrdU阳性荧光显色细胞的“镜像性”改变是反映细胞增殖活性的有效判定指标。
