摘要:
目的 构建那可丁（Nos）耐药的人结肠癌细胞株（HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos）,探究细胞株的生物学特性。方法 采用反复大剂量结合药物浓度梯度法建立人结肠癌耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos。CCK-8法检测Nos对人结肠癌细胞株HT-29、LoVo、SW480和耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos细胞的半数抑制率（IC_（50））。细胞生长曲线的测定。流式细胞术测定各组细胞株的细胞周期变化。Real time PCR和Western blot分别检测耐药相关基因和蛋白的表达。结果 成功构建人结肠癌耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos,耐药指数分别为6.37、7.15、6.81。HT-29/Nos细胞倍增时间较HT-29显著增长[（51.42±2.83）h vs（35.05±3.61）h,P〈0.05];LoVo/Nos细胞倍增时间较LoVo显著增长[（61.93±4.22）h vs（38.38±1.88）h,P〈0.05];SW480/Nos细胞倍增时间较SW480增长[（48.84±1.40）h vs（31.30±1.75）h,P〈0.05]。耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos的G_1期细胞数目显著增加（P〈0.05）,S期细胞数目显著减少（P〈0.05）。耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos的P-gp和MDR-1 mRNA和蛋白表达均高于HT-29、LoVo、SW480细胞株。结论 成功构建了Nos耐药人结肠癌细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos,为下一步耐药性分子机制的研究奠定基础。
